兔出血症病毒信使RNA的分离纯化及其生物活性的鉴定  

Rabbit Haemorrhagic Disease Virus:Isolation of Messenger RNA and Identification of Its Activity

作　　者：龚晓明[1] 杜念兴[1] 曹颉[1] 陈清轩[1] 宋德秀 

机构地区：[1]南京农业大学动物医学院,中国科学院发育生物学研究所

出　　处：《中国病毒学》1995年第2期169-176,共8页Virologica Sinica

摘　　要：用液相免疫沉淀法从感染兔出血症病毒（ＲａｂｂｌｔＨａｅｍｏｒｒｈａｇｉｃＤｉｓｅａｓｅＶｉｒｕｓ，ＲＨＤＶ）８小时后的兔肝组织的多聚核糖体中，分离出ＲＨＤＶ特异性的多聚核糖体，并由此获得全核酸，经Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ亲和层析，得到３．４Ａ＿（２６０）的ＲＨＤＶｐｏｌｙ（Ａ）￣＋ＲＮＡ占全核酸的３．５％。此Ｐｏｌｙ（Ａ）￣＋ＲＮＡ经甲醛变性琼脂糖电泳，得到６条单一的带，其大小分别为０．９５、１．２２、１．８２、２．４０、３．６３和５．０１ｋｂ。在兔网织红细胞体外翻译体系中，此Ｐｏｌｙ（Ａ）￣＋ＲＮＡ能促进￣３Ｈ－亮氨酸的掺入，其掺入量为对照组的６．３倍。翻译产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和免疫转印可得到６条带，分子量分别为６４．５６、５８．８８、５３．７０、５１．４０、２８．４４和２３．９８ｋＤ。oly(A)￣+RNAs enriched with rabbit haemorrhagic disease virus(RHDV)proteins were isolatedfrom RHDV-infected rabbit liver tissue by polysome immunoprecipitation and purified by oligo(dT)-cellulose chromatography.The purified poly(A)￣+RNA was identified through denatural agarose elec-trophoresis Six single narrow bands,5.01,3.62,2.40,1.82,1.22 and 0.95 kb respectively,were vi-sualized.The in vitro translation products of viral mRNAs have been demonstrated by SDS-PAGE and immunoblotting analysis,proteins with molecular weight of 64,59,54,51,29,24 and 20kD wereshown RHDV-specific.

关 键 词：兔出血症病毒 信使RNA 多聚核糖体 分离 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]