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作 者:靳木子[1] 马玉珍[1] 仓明[1] 王瑞[1] 任宇[1] 刘东军[1]
机构地区:[1]内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室,内蒙古呼和浩特010021
出 处:《畜牧与兽医》2010年第6期57-61,共5页Animal Husbandry & Veterinary Medicine
基 金:国家高技术研究发展计划(863计划;2008AA101005)资助
摘 要:牛胚胎干细胞的培养一直未能确定最适合的饲养层,寻找一种适合于其生长的饲养层对于成功培养牛胚胎干细胞有重要意义。本研究以胎鼠和牛胎儿为材料,分别以含10%FBS的高糖DMEM和含10%FBS的DMEMF12为培养液,分离并且获得2~5代的胎鼠成纤维细胞和5~6代的牛胎儿成纤维细胞。在上述两种成纤维细胞为饲养层的条件下,采用含10%胎牛血清、0.1 mmol/Lβ-巯基乙醇、0.1 mmol/L非必须氨基酸、100 U/mL青霉素、0.05 mg/mL链霉素、20 ng/mL LIF和10 ng/mL bFGF的DMEMF12培养液培养牛胚胎干细胞,来寻找一种适合于牛胚胎干细胞培养的饲养层。结果表明,在相同的培养体系条件下培养牛胚胎干细胞,以胎鼠成纤维细胞为饲养层的贴壁率显著高于以牛胎儿成纤维细胞为饲养层的贴壁率(P<0.05),以牛胎儿成纤维细胞为饲养层更利于胚胎滋养层的去除。
关 键 词:牛胎儿成纤维细胞 饲养层 养牛 胚胎干细胞培养 牛胚胎 鼠成纤维细胞 贴壁率 胎鼠 培养液 DMEM 细胞的培养 胚胎滋养层 条件 胎牛血清 巯基乙醇 培养体系 青霉素 链霉素 氨基酸 生长
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