幽门螺杆菌肽脱甲酰基酶基因在大肠杆菌中的可溶性表达与活性检测  

Soluble Expression of Helicobacter pylori Peptide Deformylase in E.coli and its Activity Determination

作　　者：幺山山[1,2] 曾明 章金刚[3] 

机构地区：[1]中国药品生物制品检定所 [2]军事医学科学院野战输血研究所,北京100850 [3]军事医学科学院野战输血研究所

出　　处：《生物技术通讯》2005年第4期374-377,共4页Letters in Biotechnology

摘　　要：幽门螺杆菌肽脱甲酰基酶(PDF)的可溶性表达是基于PDF靶位新药筛选的前提。本研究在克隆肽脱甲酰基酶基因(def)后,构建了其融合表达载体pTrcHisB-def,并在不同宿主菌(大肠杆菌BL21、DH5α和JM109)中进行了诱导表达。结果显示,只有在BL21(DE3)中获可溶性表达,产物经纯化后具有肽脱甲酰基酶活性。以上研究为PDF特性分析及PDF抑制剂筛选奠定了基础。To develop new drugs targeting peptide deformylase（PDF） against Helicobacter pylori, it is important to prepare a soluble and active PDF in E.coli. In this work, PDF gene （def） was cloned into pGEM-T easy vector and transferred to expression vector pTrcHisB. Different bacteria strains carrying recombinant plasmid of pTrcHisB-def were induced by IPTG to express PDF. Soluble recombinant product was achieved only in BL21（DE3）. Purified recombinant PDF （rPDF） show peptide deformylase activity in vitro. This work provided the basis for screening of PDF inhibitor.

关 键 词：肽脱甲酰基酶 基因 表达 可溶性 活性 

分 类 号：Q786[生物学—分子生物学]