流式细胞计分析海洋微微型浮游生物:样品固定及贮存方法  

PICOPLANKTON MEASUREMENT WITH FLOW CYTOMETRY: PROTOCOL OF FIXATION AND PRESERVATION

作　　者：晁敏[1] 张利华[2] 张经[2] 

机构地区：[1]中国水产科学研究院东海水产研究所,农业部海洋与河口渔业重点开放实验室,上海200090 [2]华东师范大学河口海岸国家重点实验室,上海200062

出　　处：《应用与环境生物学报》2005年第4期448-452,共5页Chinese Journal of Applied and Environmental Biology

基　　金：华东师范大学河口海岸国家重点实验室开放基金;国家重点基础研究专项经费资助(G19990437)~~

摘　　要：以流式细胞计为海洋微微型浮游生物的分析工具,研究了醛类固定剂的固定、液氮贮存对于微微型浮游生物的细胞大小、密度、藻红素荧光值(FL2)和叶绿素荧光值(FL3)的影响.实验主要结论为:1) 液氮环境适于贮存固定的微微型浮游生物样品,而未固定样品在液氮中贮存后细胞密度有损失;2) 醛类固定剂对微微型浮游生物样品的细胞密度基本没有影响;3) 醛类固定剂可增强微微型浮游生物的荧光强度,其中戊二醛主要影响聚球藻的FL2强度,多聚甲醛主要影响FL3强度.认为多聚甲醛是适用于微微型浮游生物的固定剂,推荐使用浓度为0.8%～1.2%,此外戊二醛浓度为0.05%、多聚甲醛浓度为0.8%～1.2%的混合固定剂亦适用于固定微微型浮游生物. 图4The effects of fixation with paraformaldehyde or glutaraldehyde and preservation with liquid nitrogen on cell size, density, phycoerythrin fluorescence value （FL2） and chlorophyll fluorescence （ FL3 ） of picoplanton cells were studied by using flow cytometry. The main conclusions are ： 1 ） Liquid nitrogen environment is perfect for the preservation of fixed picoplankton sample and may reduce some cell loss of unfixed sample ; 2） no significant effect of paraformaldehyde and glutaraldehyde fixation on picoplankton cell density; 3） paraformaldehyde and glutaraldehyde may reinforce the fluorescence strength, and glutaraldehyde is significant for FL2 and paraformaldehyde for FL3 ; and 4） this paper recommends that paraformaldehyde （ final concentration of 0.8% - 1.2% ） or mixed fixative of 0.05% glutaraldehyde and paraformaldehyde （ final concentration 0.8% - 1.2% ） are the common fixative for picoplankton. Fig 4,Ref 15

关 键 词：多聚甲醛 戊二醛 微微型浮游生物 聚球藻 流式细胞计 

分 类 号：Q178[生物学—水生生物学]