pcDNA3.1F9质粒介导人凝血因子IX在肠上皮细胞中的表达  

作　　者：杜建伟[1] 黄细莲[1] 文路[1] 陈方平[1] 傅敢[1] 付斌[1] 

机构地区：[1]中南大学湘雅医院血液科,湖南长沙410008

出　　处：《中国医师杂志》2005年第9期1207-1208,共2页Journal of Chinese Physician

摘　　要：目的探索肠上皮细胞用于血友病B基因治疗的可能性。方法用已构建好的质粒载体pcDNA3.1F9,以脂质体介导法转染肠上皮细胞SW480,RT-PCR检测mRNA的转录,ELISA、一期法检测蛋白表达及凝血活性。结果转染后的细胞中有人凝血因子IX(humancoagulationfactorIX,hFIX)mRNA的转录;ELISA法测得转染后24h细胞上清中的hFIX蛋白量为(11.72±0.24)ng·106cell-1·24h-1,转染后48hhFIX蛋白量为(381.34±16.16)ng·106cell-1·24h-1。一期法结果示细胞上清中的hFIX有凝血活性,转染后48h达(45±0.85)%·106cell-1。结论肠上皮细胞SW480转染pcDNA3.1F9质粒后可表达有凝血活性的hFIX,肠上皮细胞有望成为血友病B基因治疗的靶细胞。

关 键 词：肠上皮细胞 凝血因子IX 基因治疗 人凝血因子IX 质粒介导 RT-PCR检测 细胞SW480 ELISA法 hFIX 脂质体介导法 

分 类 号：R554[医药卫生—血液循环系统疾病]