转基因小麦的PCR快速检测  

Rapid confirmation of the transgenic wheat lines by polymerase chain reaction(PCR)

作　　者：孟超敏[1] 张晓东[2] 陈天佑[3] 

机构地区：[1]河南科技大学农学院,河南洛阳471003 [2]北京农业生物技术研究中心,北京100089 [3]西北农林科技大学农学院,陕西杨凌712100

出　　处：《西北农林科技大学学报（自然科学版）》2005年第10期24-28,共5页Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition)

摘　　要：采用改进的CTAB法,研究了与PCR相匹配的转基因小麦单株微量DNA的快速提取方法.结果表明,该提取方法简便、快速、有效,提取的DNA产量和质量完全可以用于PCR扩增.对标准PCR的反应体系进行优化,建立了最佳的转外源高赖氨酸基因小麦植株的PCR扩增体系,即10×Reaction Buffer 2.5 μL,MgCl2 25 mmol/L,dNTPs 2.5 mmol/L,模板DNA 30～60 ng,引物1.2 μmol/L,Taq酶1 U,加ddH2O至25 μL,优化的PCR反应体系显著提高了转基因小麦植株筛选和鉴定的效率.A new rapid DNA extraction method was developed for transgenic wheats identified by PCR. The result showed that this method was convenient ,quick and effective. The quality of DNA extracted using this method was suitable for PCR analysis. An optimal reaction sytstem suitable for alien lysinerich gene PCR was also established in this research： 10 × Reaction Buffer 2.5μL,MgCl2 25 mmol/L,dNTPs 2.5 mmol/L,Genmonic DNA 30-60 ng,primers 1.2 μmol/L,Taq enzyme 1 U,ddH2O to 25μL.

关 键 词：转基因小麦 DNA提取 PCR 反应体系优化 

分 类 号：S512[农业科学—作物学] Q78[生物学—分子生物学]