荧光定量RT-PCR检测糖尿病病人PBMC中TGF-β1表达水平  

作　　者：李君[1] 季敬璋[2] 

机构地区：[1]温州医学院检验医学院2000年级,浙江温州325000 [2]温州医学院生命科学学院,浙江温州325000

出　　处：《检验医学教育》2005年第3期37-39,共3页

摘　　要：目的:应用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),检测糖尿病病人外周血单个核细胞 (PBMC)中TGF-β1mRNA的表达水平。方法:分离外周血单个核细胞,用Trizol裂解液提取总RNA,逆转录为cDNA,在扩增体系中加入SYBR Green I,应用FQ-RT-PCR定量检测TGF-β1mRNA。结果:重组质粒测序证明插入的片断为TGF-β1特异性片断,荧光定量RT-PCR检测TGF-β1 mRNA的灵敏度达105拷贝/ml, 线性范围为105-1011拷贝/ml,批内、批间变异系数分别为2.27%-2.56%和4.78%-5.22%,临床应用显示,糖尿病患者PBMC中TGF-β1 mRNA含量显著高于正常。结论:FQ-RT-PCR检测TGF-β1mRNA具有灵敏、特异、快速等特点,为临床应用提供了方法学依据。

关 键 词：转化生长因子-β1 逆转录聚合酶链反应 荧光定量 荧光定量逆转录聚合酶链反应 定量RT-PCR检测 TGF-β1表达 人PBMC TGF-Β1MRNA 人外周血单个核细胞 病病 

分 类 号：R446.62[医药卫生—诊断学] R735.2[医药卫生—临床医学]