利用正义和反义技术研究着丝粒/动粒复合体蛋白CENP-B在细胞周期调控中的作用  

作　　者：罗松[1] 林海燕[1] 齐建国[1] 王永潮 

机构地区：[1]北京师范大学生命科学学院细胞增殖与调控教育部国家重点实验室,北京100875

出　　处：《科学通报》2005年第21期2352-2358,共7页Chinese Science Bulletin

基　　金：国家自然科学基金(批准号:39430080)资助项目

摘　　要：为研究着丝粒/动粒复合体蛋白(centromere/kinetochore complexprotein-B,CENP-B)高表达和低表达在细胞周期调控中的作用,将全长CENP-BcDNA基因(cenpb)构建到pBI-EGFP真核表达载体上,获得正义和反义cenpb真核表达重组质粒,并转染HeLa-Tet-Off细胞.结果表明,正义质粒转染导致细胞产生巨型着丝粒/动粒复合体,细胞分裂几次后发生凋亡;转染反义质粒至HeLa-Tet-Off细胞,克隆筛选获得稳定表达反义cenpb的细胞株HACPB.HACPB细胞着丝粒/动粒复合体小、数量多,CENP-B表达量低;细胞周期延长,恶性表型降低,裸鼠致瘤能力降低,G2/M期向下一周期的G1期过渡发生延迟.细胞周期蛋白相关激酶(cyclin-dependentkinases,CDKs)、细胞周期蛋白、细胞周期蛋白相关激酶抑制剂(CDKinhibitors,CKIs)等的表达在某时相发生特异的变化.这些结果说明,CENP-B是维持着丝粒/动粒复合体正常结构和功能的必需组分,并参与细胞周期调控.

关 键 词：着丝粒/动粒复合体 CENP-B 细胞周期调控 正义和反义技术 

分 类 号：Q253[生物学—细胞生物学] Q78