增强型绿色荧光蛋白在莱茵衣藻中的高效表达  

High-efficient Expression of Enhanced Ereen Fluorescent Protein(eGFP)in Chlamydomonas Reinhardtii

作　　者：胡章立[1] 王潮岗[1] 吴锦霞[1] 

机构地区：[1]深圳大学生命科学学院

出　　处：《深圳特区科技》2005年第11期217-222,共6页Shenzhen Science & Technology

摘　　要：莱茵衣藻素有“光合酵母”之称,是目前少数三套基因组均能进行遗传转化的生物。但由于莱茵衣藻细胞中存在复杂的表达调控体系、密码子偏爱等原因,莱茵衣藻的外源基因表达体系目前还处于探索阶段。通过构建两个莱茵衣藻外源基因表达载体,即以 RBCS2序列为启动子的 p105和以 HSP70A-RBCS2序列为启动子的 pH105,分别将增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)插入两个表达载体中,得到 p105G124和 pH105G124转化载体。然后通过“珠磨法”转化细胞壁缺陷的莱茵衣藻 cc-849,并得到两种类别的转基因藻 Tran-Ⅰ和 Tran-Ⅱ。在光诱导和热激诱导条件下,两种类型的转基因藻均能稳定表达绿色荧光蛋白。通过实验比较二者的转化效率和蛋白表达水平,结果显示 pH105可使 egfp 基因的转化效率提高8倍;HSP70A-RBCS2启动子至少使绿色荧光蛋白的表达水平提高了2倍,40℃热激后绿色荧光蛋白的表达量再提高约3倍。以上结果表明获得的pH105是一个高效、可诱导的莱茵衣藻外源基因表达载体,这为利用莱茵衣藻高效表达外源基因和开发生物反应器奠定基础。

关 键 词：莱茵衣藻 转基因藻 HSP70A-RBCS2启动子 EGFP基因 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学] Q945.11