抗CD44抗体单链抗体构建及表达  

Establishment and Expression of Monochain Anti - CD Antibady

作　　者：宋国丽[1] 李彬[2] 吴立华[2] 刁世勇[2] 韩忠朝[2] 

机构地区：[1]广东省深圳大学生命科学学院,518060 [2]中国医学科学院/中国协和医科大学血液学研究所

出　　处：《医学研究通讯》2005年第10期42-44,共3页Bulletin of Medical Research

摘　　要：目的构建抗 CD44抗体的单链抗体(anti-CD44-ScFv),为进一步应用基因工程抗体研究打下基础。方法从分泌抗 CD44单克隆抗体的杂交瘤细胞系 HII44a 中提取总 RNA,经 RT-PCR 分离获得了轻、重链可变区(V_L、V_H)基因,用连接肽将其构建成具有 V_L-Linker-V_H 结构的单链抗体基因,并将构建的单链抗体基因克隆到分泌型蛋白表达载体 PET22b(+)中进行表达。结果经测序表明,V_H、V_L 及 Linker 的序列正确。ScFv 在大肠杆菌中的表达量约占菌体总蛋白的16%。能够特异性与 CD44抗原结合。结论成功构建抗 CD44抗体单链抗体,为进一步制备基因工程抗体奠定了基础。

关 键 词：基因 克隆 单链抗体 基因表达 抗CD44抗体 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学] R733.7[医药卫生—基础医学]