八肋游仆虫中心蛋白N-端半分子与Tb^(3+),Ca^(2+)的结合(英文)  

Terbium- and Calcium-binding Properties of N-terminal Domain of Euplotes Centrin

作　　者：任列香[1] 赵亚琴[1] 丰九英[1] 贺晓静[1] 梁爱华[1] 杨斌盛[1] 

机构地区：[1]山西大学分子科学研究所,化学生物学与分子工程教育部重点实验室,太原030006

出　　处：《无机化学学报》2006年第1期87-90,共4页Chinese Journal of Inorganic Chemistry

基　　金：国家自然科学基金(No.20371031);山西省自然科学基金(No.20031017)资助项目。

摘　　要：用分子生物学方法表达、纯化了游仆虫中心蛋白及N-端半分子,用铽荧光探针法、离子竞争法研究了pH7.4,0.01mol·L-1Hepes条件下中心蛋白与铽、钙的结合性质。结果表明中心蛋白有4个铽结合部位,其中2个为高亲合结合部位、2个为低亲合结合部位。具有2个低亲合结合部位的中心蛋白半分子与铽结合的条件常数是(2.13±0.10)×105L·mol-1,与钙结合的条件常数是(7.52±0.02)×102L·mol-1。Euplotes centrins （EoCens） including full-length protein （apoEoCen） and semi-molecule centrin （NapoEoCen） were expressed and purified by biological engineering. The binding of terbium （Tb3~） to apoEoCen was monitored by fluorescence in 0.01 mol·L^-1 N-2-hydro-xyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic acid （Hepes）, at pH 7.4. It could be seen that the protein binds two Tb^3＋ with high affinity and two Tb^3＋ with low affinity. The reactions between N-apoEoCen and Tb^3＋ or Ca^2＋ were also studied by Tb^3＋ fluorescence probe and ionic competition in 0.01 mol.L^-1 Hepes, at pH 7.4. On the basis of fluorescence titration curves, the conditional binding constant of Tb2-N-EoCen was determined to be （2.13 ±0.10）×10^5L·mol^-1 and the relative binding constant of Ca2-N-EoCen was calculated to be （7.52 ±0.02）×10^2L·mol^-1.

关 键 词：中心蛋白 荧光 铽离子 钙离子 

分 类 号：O614.23[理学—无机化学] O614.33[理学—化学]