应用Aptamer分子提高实时定量PCR的特异性  

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作  者:李柏生[1] 李芳[1] 王先良[1] 张迟[1] 徐顺清[1] 

机构地区:[1]华中科技大学同济医学院公共卫生学院环境与健康教育部重点实验室,武汉430030

出  处:《广东医学》2006年第1期35-36,共2页Guangdong Medical Journal

基  金:国家自然科学基金资助项目(编号:20377017)

摘  要:目的探讨Aptamer应用于普通Taq酶扩增的实时定量(Real-time)PCR反应体系能否提高反应的特异性,减少引物二聚体的产生。方法在使用SYBR Green I作荧光染料,普通Taq酶扩增的Real-time PCR反应体系中添加一定量的Aptamer,与未加Aptamer的PCR反应体系和采用了热启动酶的反应体系同时在Reche Light-Cycle 2.0中进行扩增。结果添加了Aptamer和采用热启动酶的反应体系,引物二聚体得到有效的控制,而未加Aptamer的反应体系,融解曲线中,在产物峰前面有明显的代表引物二聚体的“肩峰”出现。结论Aptamer分子可以有效的抑制引物二聚体的产生和非特异性产物的扩增。

关 键 词:聚合酶链式反应 二聚体 特异性 

分 类 号:R446.6[医药卫生—诊断学] R135.12[医药卫生—临床医学]

 

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