抗人白介素-28A单克隆抗体的制备与鉴定  

作　　者：陈玉珍[1] 何韶衡[1] 周艳春[1] 黄阗[1] 李明才[1] 刘岳宁[1] 陈霖霏[1] 傅意玲[1] 方泽漫[1] 

机构地区：[1]汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所,广东汕头515031

出　　处：《广东医学》2006年第3期328-330,共3页Guangdong Medical Journal

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:30471601);广东省科技计划重点项目(编号:2003B31502);广东省自然科学基金重点项目(编号:04106122);李嘉诚先生捐资款专项经费(编号:C0200001)

摘　　要：目的制备抗人白介素-28A(hIL-28A)单克隆抗体(mAb)。方法以hIL-28A融合蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗hIL-28A mAb。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类,通过ELISA、Western blot、免疫组化染色法、流式细胞分析、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性。结果获得2株稳定分泌抗hIL-28A mAb的杂交瘤细胞,但2株mAb均与hIL-29有弱交叉反应。2株mAb的类别均为IgM。Western blot分析表明,此mAb所识别的靶分子的相对分子质量(Mr)约为19 000。免疫组化染色表明,mAb与包皮和肺组织中的上皮细胞、结肠组织中的疑似巨噬细胞呈阳性反应。流式细胞仪分析显示,2株mAb与人脐静脉内皮细胞系HUVEC细胞的反应均呈阳性。激光共聚焦扫描显微镜观察到荧光标记的阳性反应物主要位于HUVEC细胞胞浆内。结论成功地制备抗hIL-28A mAb,为病毒感染性疾病、肿瘤和其他疾病的研究提供新的手段。

关 键 词：人白介素-28A 单克隆抗体 特性鉴定 

分 类 号：R392-33[医药卫生—免疫学] R562.25[医药卫生—基础医学]