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作 者:石火英[1] 张小荣[1] 陈素娟[1] 吴艳涛[1] 刘秀梵[1]
机构地区:[1]扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏扬州225009
出 处:《病毒学报》2006年第2期126-130,共5页Chinese Journal of Virology
基 金:江苏省属高校重大基础研究项目资助(05KJA23016);农业部资助项目(农办牧200183)
摘 要:利用反向遗传技术将含有A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)株禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的6个内部基因与H5N1亚型AIV的2个表面基因HA和NA共转染COS-1细胞,产生了6+2全禽源的重配AIV。将H5N1亚型AIV的HA基因经基因突变致弱,然后将A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)AIV的6个内部基因的cDNA和以上致弱的禽源HA基因及NA基因的cDNA分别克隆到转录/表达载体pHW2000中,构建成8个转录/表达质粒。将8个质粒共转染COS-1细胞,24h后收获细胞及上清接种SPF鸡胚,72~90h后鸡胚死亡,收取鸡胚尿囊液进行血凝、血凝抑制试验、序列分析、病毒致病性试验和动物免疫保护试验,最终证实产生了致弱的全禽源AIV瘩苗候诜株.Eight-plasmid system was used for the generation of avian influenza virus (AIV) vaccine candidate strain rgF-H5△N1 AIV. The strain contained hemagglutinin (HA) and neuraminidase( NA ) genes from epidemic strains in a background of internal genes derived from A/Chicken/Shanghai/F/98 (H9N2) strain. The removal of the multibasic amino acid motif in the HA gene associated with high pathogenicity in chickens. The rgF-H5△N1 AIV attenuated the viral virulence for chickens without altering the antigencity of the HA. A for- malin-inactivated vaccine prepared from this virus was immunogenic and protected chickens from subsequent wild-type H5N1 virus challenge. This is the first successful attempt to develop an H5N1 vaccine from avian influenza genes by plasmid-based reverse genetics at home and abroad.
分 类 号:S858.3[农业科学—临床兽医学]
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