诱骗受体DcR3的基因构建、表达及特异性鉴定  

作　　者：李文珠[1] 陶惠然[2] 颜江华[2] 张长弓[2] 苏金华[2] 王阶平[1] 杨桂旺[1] 庄国洪[1] 

机构地区：[1]厦门大学生命科学学院,福建厦门361005 [2]厦门大学医学院抗癌研究中心,福建厦门361005

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2006年第2期151-153,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：厦门大学科研启动基金资助(No.Z03103)

摘　　要：目的:构建适于原核表达的人诱骗受体DcR3基因,并进行重组蛋白的表达纯化及特异性鉴定。方法:查得人DcR3cDNA全序列,将其分段设计引物,通过重叠PCR获得DcR3基因。构建pET-22b(+)/DcR3表达载体,转化大肠杆菌Rosseta-gami,IPTG诱导表达,Ni柱纯化。采用ELISA进行特异性鉴定。结果:通过重叠PCR获得了编码正确氨基酸序列的目的基因。目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上。纯化后,蛋白纯度达95%以上。ELISA结果表明所纯化的蛋白可与抗DcR3抗体发生特异结合。结论:诱骗受体DcR3基因的成功构建、表达及纯化,为进一步的功能研究奠定了基础。

关 键 词：DCR3 基因构建 基因表达 

分 类 号：Q786[生物学—分子生物学]