抗SARS冠状病毒M蛋白片段单克隆抗体的制备与初步鉴定  

作　　者：钱超[1] 姜平[2] 卢春[3] 姚堃[3] 

机构地区：[1]解放军第454医院检验科,江苏南京210002 [2]南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫开放实验室,江苏南京210095 [3]南京医科大学微生物学与免疫学系,江苏南京210029

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2006年第2期213-215,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：江苏省卫生厅非典快速启动项目(No.H200308);江苏省教育厅SARS专项研究课题(No.JH03-054);南京医科大学科技发展项目;江苏省南京市科技局SARS专项研究课题(No.200302004)

摘　　要：目的： 制备抗SARS冠状病毒（SARS-CoV） M 蛋白N端1～43氨基酸（aa）单克隆抗体（mAb）, 并对其特性进行初步鉴定.方法： 用纯化的SARS-M/GST融合蛋白抗原免疫BALB/c小鼠, 采用杂交瘤技术制备抗M蛋白片段的mAb.用间接ELISA法筛选能分泌抗M蛋白片段mAb的杂交瘤细胞株. Western blot和间接ELISA鉴定所获mAb的特异性, 并用小鼠mAb亚类测定试剂盒检测所获的mAb Ig亚类.为分析mAb识别位点, 进一步将M蛋白片段截短为部分重叠的2段表达, 以Western blot初步定位mAb识别位点.结果： 获得1株可分泌特异性抗SARS-CoV M蛋白片段的mAb杂交瘤细胞株（3H9）, Ig亚类鉴定为IgG2a, 轻链为κ型.Western blot显示其mAb可特异识别SARS-CoV M蛋白N端1～43aa, 间接ELISA证实mAb可与包被于聚苯乙烯微孔板上的SARS病毒全蛋白抗原发生特异性反应, 其识别位点位于M蛋白N端16～28aa.结论： 成功获得1株抗SARS-CoV M蛋白N端1～43aa mAb杂交瘤细胞, 并初步定位其识别位点.

关 键 词：SARS冠状病毒 单克隆抗体 M蛋白 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]