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作 者:段春光[1] 杨守京[1] 余璐[1] 吴艺舟[2] 刘彦仿[1]
机构地区:[1]第四军医大学病理学教研室,陕西西安710032 [2]西北大学陕西省生物技术重点实验室,陕西西安710069
出 处:《细胞与分子免疫学杂志》2006年第2期219-220,共2页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology
基 金:国家自然科学基金资助项目(No.30271186)
摘 要:目的:制备高效价的抗人IgG单克隆抗体(mAb),并用于肾脏免疫性疾病的免疫荧光诊断。方法:以人IgG全长分子免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合,经筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗IgGmAb的杂交瘤细胞株。用ELISA及Westernblot鉴定mAb的特性(效价、Ig亚类、特异性及相对亲和力)。以纯化的mAb建立免疫荧光染色法,并用于肾小球肾炎的诊断。结果:筛选到1株可稳定分泌抗人IgGmAb的细胞株,腹水效价为1×10-6,Ig亚类为IgG2a(κ),相对亲和力达到1×10-5,Westernblot显示在相对分子质量(Mr)为53×103处出现特异性的条带,说明mAb能与IgG的γ链特异性结合。免疫荧光染色的结果显示,IgG分子在肾小球肾炎的活检组织中表达。结论:获得1株能特异性识别人IgG的mAb,可用于肾脏免疫性疾病的病理诊断。
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