新型Taq Man-MGB探针实时荧光定量PCR检测人类mdr1基因  

Detection of mdr1 gene by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction using Taq Man-MGB probe

作　　者：邹亚伟[1] 封志纯[2] 胡斌[3] 乔英飒[3] 吴梓梁[1] 陈福雄[1] 叶铁真[1] 

机构地区：[1]广州医学院第一附属医院儿科,广东广州510120 [2]南方医科大学珠江医院儿科,广东广州510282 [3]中山大学达安基因诊断中心,广东广州510089

出　　处：《南方医科大学学报》2006年第4期466-468,共3页Journal of Southern Medical University

基　　金：广东省医学科学技术研究基金(2005288)~~

摘　　要：目的建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的人类mdr1基因的新型实时荧光定量PCR检测新方法。方法用Primer Express 2．0引物设计软件设计引物和MGB探针,以Taq Man-MGB探针技术为基础,运用Taq Man-MGB探针,以含有目的基因mdr1cDNA的质粒pHaMDR1／A为阳性模板,建立实时荧光定量PCR检测方法。结果所建立方法的最低检测限度为15个基因拷贝／反应,在待扩增DNA浓度为3．061×103 cps／ml-3．061×109cps／ml范围时,模板浓度与循环阈值(Ct)之间的相关性良好,决定系数r2为0．988243。结论应用Taq Man-MGB探针的实时荧光定量PCR方法检测人类mdr1基因,具有灵敏度高、特异性高和精确性高等优点。Primer Express 2.0 software was used to design the primers and the MGB probe. With the plasmid pHaMDR1/A containing mdrl cDNA as the template, we established a real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction system, which, at the template concentration of 3.061×10^3 to 3.061×10^9 cps/ml, had a correlation coefficient of 0.988243 between template concentration and threshold cycle value. This PCR method allows sensitive, specific and quantitative detection of human mdrl gene.

关 键 词：TAQ Man-MGB探针 实时荧光定量PCR mdr1 

分 类 号：Q987-33[生物学—遗传学]