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作 者:张杰[1] 刘莹[1] 宗志红[1] 宿文辉[1] 于秉治[1]
机构地区:[1]中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,沈阳110001
出 处:《细胞生物学杂志》2006年第2期243-247,共5页Chinese Journal of Cell Biology
基 金:国家自然科学基金资助项目(No.30170987)~~
摘 要:利用红色荧光蛋白表达载体pDsRed1-N1与人睾丸中牛精浆相关蛋白基因(hbrp)重组为pDsRed1-N1/hbrp,真核表达载体pcDNA3.1-myc-his与hbrp重组为pcDNA3.1-myc-his/hbrp,分别转染HEK293细胞,建立稳定的真核表达细胞系。在荧光显微镜下观察HBRP的亚细胞定位,并用放射自显影检测该细胞系的蛋白激酶C(PKC)活性。HBRP定位在细胞膜及胞浆近膜处;HBRP对PKC活性有明显的抑制作用。从而确定了人新的精子结合蛋白HBRP在细胞内的定位,并认定了HBRP为有生物活性的功能蛋白。Two recombinant eukaryotic expression vectors, pDsRedl-N1/hbrp and pcDNA3.1-myc-his/ hbrp, have been constructed and used to transfect HEK293 cell to form a stable expression cell line. The cellular localization and biological function of HBRP were investigated using fluorescence microscope and radioautography method, respectively. The experimental results showed that HBRP was a functional protein which localizes in the cellular membrane and cellular plasma near the membrane, and had a notable inhibitory effect on the PKC activity.
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