水稻线粒体tRNA^(Trp)的种属特异性氨酰化  

作　　者：金晓玲[1,3] 陶志坚[1] 贾捷[2] 何新霞[1] 金由辛[2] 

机构地区：[1]浙江师范大学化学与生命科学学院 [2]中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,分子生物学国家重点实验室 [3]中南林学院环艺学院,长沙410004

出　　处：《科学通报》2006年第7期827-832,共6页Chinese Science Bulletin

基　　金：浙江省自然科学基金资助项目(批准号:302103).

摘　　要：为了研究原核生物和真核生物（细胞质）色氨酰tRNA合成酶（TrpRS）对线粒体tRNA^Trp识别的种属特异性，构建了7个水稻线粒体tRNA^Trp三位点（G73，U72，A68）的单点或多点突变的突变体．这些突变基因，经体外转录后分别用枯草杆菌（B．subtilis）和人色氨酰tRNA合成酶（TrpRS）进行氨酰化反应，并测定它们的动力学常数．结果表明，与野生型水稻线粒体tRNA^Trp相比，7个突变体的转录产物被B．subtilis TrpRS氨酰化的活力分别降低了53．33％-99．79％，被人TrpRS氨酰化的活力却分别提高了4～330倍，其中以MPH7（水稻线粒体tRNA^Trp的三碱基（G73，U72和C68）全部突变为人tRNA^Trp的三碱基序列）的氨酰化活力改变最大．实验结果证明，与真核生物和原核生物细胞质tRNATrp的种族特异性类似，水稻线粒体tRNA^Trp的种属特异性元件也主要处于氨基酸接受茎的识别位碱基、第一和第五对碱基对，亦即识别位碱基G73，氨基酸接受茎上的两个碱基对G1／U72和U5／A68．本研究为线粒体tRNA^Trp起源于真细菌的推论提供了实验依据．

关 键 词：种属特异性氨酰化 色氨酸tRNA 色氨酰tRNA合成酶 水稻 线粒体 

分 类 号：S511[农业科学—作物学]