人骨唾液蛋白膜靶向表达载体的构建及在乳腺癌细胞中的表达  

作　　者：杜红延[1] 王捷[1] 郑霖[1] 杨静[1] 刘大志[1] 

机构地区：[1]广州军区广州总医院医学实验中心

出　　处：《广东医学》2006年第5期659-661,共3页Guangdong Medical Journal

基　　金：广东省自然科学基金资助项目(编号:04003534);广东省医学科学技术研究基金资助项目(编号:A2002536)

摘　　要：目的构建人骨唾液蛋白(BSP)膜靶向表达载体,并转染人乳腺癌细胞,筛选获得稳定转染细胞,为进一步体内外研究BSP在乳腺癌骨转移中的作用奠定基础。方法通过PCR的方法从pB-hBSP载体中亚克隆人骨唾液蛋白hbsp基因,定向克隆至细胞膜靶向定位真核表达载体pDisplayTM中,构建中间重组载体pDisplay-hB-SP,再次通过PCR的方法从构建的pDisplay-hBSP载体中亚克隆出膜靶向信号肽、hbsp以及细胞膜定位蛋白基因,定向克隆至真核表达载体pIRES2-EGFP,构建重组复合载体pID-hBSP-EGFP,利用脂质体转染特异性骨转移的乳腺癌细胞。结果重组载体pDisplay-hBSP和pID-hBSP-EGFP插入目的片段的测序结果与Genbank中发表的BSP序列基本一致。结论成功构建了人骨唾液蛋白膜靶向表达载体,并且经转染后成功在特异性骨转移的乳腺癌细胞株MDA-MB-231BO中表达。为下一步进行体内外试验研究BSP在乳腺癌骨转移中的作用奠定基础。

关 键 词：骨唾液蛋白 细胞膜 绿色荧光蛋白 乳腺癌细胞 表达 

分 类 号：R512.62[医药卫生—内科学] R737.9[医药卫生—临床医学]