SARS冠状病毒蛋白酶3CL^(pro) N-finger多肽是酶活性所必需(英文)  

The N-Finger Peptide of SARS-CoV 3CL^(pro) is Essential for the Enzyme Activity

作　　者：张笋华[1] 姬明放 邵晓霞[3] 

机构地区：[1]华东师范大学生命科学学院生物系,上海200062 [2]神隆(昆山)生化科技有限公司,昆山215300 [3]同济大学蛋白质研究所,上海200092

出　　处：《细胞生物学杂志》2005年第6期657-661,共5页Chinese Journal of Cell Biology

基　　金：国家重点基础研究发展规划项目(973计划)(No.2003CB514107)~~

摘　　要：构建了 SARS冠状病毒主要蛋白酶3CLpro 及其缺失N 端七肽即N-finger的突变体3CLpro(?1–7)融合表达质粒,并于大肠杆菌表达系统中表达。得到的融合蛋白经肠激酶酶切,亲和层析,最终得到纯化的3CLpro及其突变体 3CLpro(?1–7)。酶活性实验显示,去除 N-finger多肽的突变体3CLpro(?1–7)丧失了3CLpro所具有的对含有其自动水解位点的荧光底物的水解活性,表明处于非酶活性中心的N-finger 多肽是酶活性所必需的。利用固相合成法,进一步合成了N-finger七肽。酶抑制实验表明N-finger七肽表现了对3CLpro 部分竞争抑制活性。The genes encoding 3CL protease （3CL^pro） of SARS virus and its mutant 3CL^pro（△1-7） were constructed and expressed in E.coli system. The 3CL^pro showed a proteolytic activity on the fluorogenic substrate containing the consensus auto-cleavage site of 3CL^pro. However, the 3CL^pro（△1-7） mutant showed no enzymatic activity at the same conditions as wild type did, indicating that the N-finger peptide of 3CL^pro is essential for the enzymatic activity though it is not the enzyme reactive center. We also synthesized the N-finger peptide by solid-phase peptide synthesis method and this peptide showed partially inhibitory effect on the SARS 3CL protease.

关 键 词：SARS冠状病毒 3CL^pro蛋白酶 N—finger多肽 

分 类 号：R373[医药卫生—病原生物学]