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作 者:李彦锋[1,2] 郭应禄[2] 李晓红[3] 靳凤烁[1] 孙中义[1]
机构地区:[1]第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,重庆400042 [2]北京大学第一医院泌尿外科研究所,北京 100034 [3]北京大学第一医院生殖和遗传医疗中心,北京100034
出 处:《中国生物学文摘》2006年第5期55-55,共1页Chinese Biological Abstracts
摘 要:目的:通过应用多种培养条件下的生殖细胞共培养体系,寻求人精原干细胞(SSC)长期体外生存和扩增的优化途径。方法:应用磁式分选所获得的α6^+Thy-1^+c-kjt^-细胞,分别以STO、MEF、Sertoli细胞为饲养层,于DMEM/F12、DMEM或DMEM-SF培养液条件下短期培养,然后选择胎儿Sertoli细胞作为共培养体系,在32℃、5%CO,、DMEM/F12(含10%胎牛血清)培养条件下,分别观察成人和胎儿生殖细胞的长期培养结果。并应用免疫组化技术和SSC移植技术对培养细胞进行初步生物学特性和功能鉴定。结果:在短期培养中,仪α6^+Thy-1^+c-kjt^-细胞在存在饲养层时,可在DMEM和DMEM/F12培养液中稳定生存,1周内存活率可达909,6。长期培养条件下,α6^+Thy-1^+c-kjt^-细胞逐渐与Sertoli细胞形成紧密的贴附或镶嵌关系,呈单个、成对、短链状或小团簇状;胎儿SSC与成人类似,部分以圆球形散在分布于Sertoli细胞表面,并常可观察到明显的成对或短链状细胞,部分呈有突起的长梭形扁平细胞,与Sertoli细胞相互形成紧密连接;
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