大鼠肝脏细胞核白蛋白基因转录活性测定  

THE ASSAY OF IN VITRO TRANSCRIPTION IN ISOLATED NUCLEI FROM RAT LIVER

作　　者：李丽英[1] 陈孟华[1] 王海燕[1] 童坦君[1] 

机构地区：[1]北京医科大学第一医院肾内科,北京医科大学第一医院生物化学与分子生物学系

出　　处：《北京医科大学学报》1996年第3期202-204,共3页Journal of Peking University(Health Sciences)

基　　金：卫生部基金

摘　　要：目的：探讨在有限实验条件下，应用游离细胞核基因转录活性测定方法的可能性。方法：采用三因素、二水平正交设计表。结果：对大鼠肝脏白蛋白基因转录活性的最适测定条件为：ｃＤＮＡ上样量２μｇ；细胞核与底物孵育最适温度３０℃；［α－３２Ｐ］－ＵＴＰ的使用量１４８０ｋＢｑ。结论：应用此实验条件可使放射性核素及ｃＤＮＡ探针用量减少，降低核基因转录活性实验成本，提高其应用可行性。Objective:To assess the appropriate condition of assay for in vitro albumin gene transcription in isolated nuclei from rat liver. Methods: Orthogonal experiment design[L(23)] was supplied as fac-tors of amount of[α-32P]-UTP(1 480 kBq, 2 960 kBq),albumin cDNA(2μg,4μg),and temperature of incubation for experiment(30 ℃, 20 ℃) at two levels,Results:The best conditions are 1 480 kBq of[α-32P]-UTP,2 μg albumin cDNA probe and incubation at 30 ℃ Conclusion:In these condition,nuclear run-on assay will be available for specific study because it hecomes much cheaper than it usually does.

关 键 词：转录 遗传 核蛋白 肝脏 

分 类 号：Q75[生物学—分子生物学]