染色体步行PCR技术  

PCR Techniques for Chromosome Walking

作　　者：王闵霞[1] 马欣荣[1] 王天山[1] 谭红[1] 

机构地区：[1]中国科学院成都生物所,成都610041

出　　处：《应用与环境生物学报》2006年第3期427-430,共4页Chinese Journal of Applied and Environmental Biology

基　　金：国家"863"高技术资助项目(2001AA246061)~~

摘　　要：染色体步行是一种常用的克隆已知基因旁侧序列的技术.本文综述了现有的染色体步行PCR技术,如反向PCR、锅柄PCR、连接介导PCR、热不对称PCR、SON PCR等,并在此基础上提出了一种新的染色体步行PCR技术的构思.它运用特异引物与随机引物的搭配,在普通PCR程序下扩增目的序列.实验中设置相应随机引物的RAPD对照,识别非目的扩增产物.文中介绍了新方法的原理,分析了这种方法的优缺点.这种方法可能是一种新的有效进行染色体步行的PCR技术,国内外尚未见相关报道.Chromosome walking techniques are commonly used for cloning the known flanking sequence. This paper reviews the existing chromosome walking PCR techniques, such as inverse PCR, panhandle PCR, ligation mediated （LM） PCR, thermal asymmetric interlaced （TAIL） PCR and single oligonucleotide nested （SON） PCR, and also puts forward a new chromosome walking method. Using this method the objective products are amplified under common PCR proceeding with particular primer and random primer. Comparison experiments with corresponding random primer pairs are conducted to identify the nonobjective products. This method may be a new and effective technique for chromosome walking. Fig 2, Ref 26

关 键 词：染色体步行 特异引物 随机引物 新技术 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]