新型乙肝表面抗原中蛋白核酸疫苗在中国猕猴体内免疫原性初步研究  

Immunogenicity of a novel DNA vaccine encoding middle hepatitis B surface antigen in rhesus macaques

作　　者：贺奇彬[1] 邢益平[1] 潘素霞[1] 张建桥[1] 何小敏[1] 韩亚萍[1] 李军[1] 黄祖瑚[1] 王世霞 卢山 

机构地区：[1]南京医科大学第一附属医院感染病科,江苏南京210029 [2]美国马萨诸塞州大学医学院

出　　处：《南京医科大学学报（自然科学版）》2006年第7期491-495,共5页Journal of Nanjing Medical University(Natural Sciences)

基　　金：江苏省135工程重点医学人才基金资助(135-044)

摘　　要：目的:观察乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白(MHBs)核酸疫苗在中国猕猴体内的体液和细胞免疫应答。方法:实验用中国猕猴实验组、对照组各2只,分别在第0、8、16、24、48周肌肉注射法接种核酸疫苗(pSW3891/MHBs)或对照载体(pSW3891)。ELISA法检测中国猕猴血清抗-HBs,CFSE-PI染色FCM(流式细胞术)法测定中国猕猴外周血淋巴细胞HBsAg特异性增殖反应。结果:实验组中国猕猴血清抗-HBs滴度在72周达到最高峰,最高滴度分别为1∶6400和1∶12800,对照组抗-HBs滴度始终保持在1∶50。实验组中国猕猴外周血淋巴细胞HBsAg特异性增殖反应明显增强,细胞分裂指数分别为18.64和14.70,而对照组细胞分裂指数分别为1.62和2.61。结论:建立了CFSE-PI染色流式细胞仪检测法来检测中国猕猴外周血淋巴细胞HBsAg抗原特异性增殖反应,方法创新,实用可靠。新型乙肝表面抗原中蛋白核酸疫苗pSW3891/MHBs在中国猕猴体内能产生良好的特异性体液和细胞免疫应答。Objective： To observe the humoral and cellular immune responses of rhesus macaques induced by a novel DNA vaccine encoding middle hepatitis B virus surface antigen（MHBs）. Methods： Four rhesus macaques were divided into two groups. Each group received five i.m. doses of pSW3891/MHBs or the vector pSW3891 at 0, 8, 16, 24 and 48 weeks. Anti-HBs in sera Was tested by ELISA （enzyme linked immunosorbent assay）. HBsAg specific T lymphocyte proliferative response in peripheral blood mononuclear cells （PBMCs） labeled with carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester （CFSE）-PI was analyzed by Flow Cytometry （FCM）. Results： The rhesus macaques immunized with pSW3891/MHBs showed strong anti-HBs response （ending point 1 ： 6400 and 1 ： 12 800）, compared with the controls （ending point 1 ： 50）. The proliferative response of the PBMCs of immunized rhesus macaques （cell division index 18.64 and 14.70） is stronger than the controls （cell division index 1.62 and 2,61）. Conclusion： To assess specific T lymphocyte proliferation a flow cytometry assay using PBMCs labeled with CFSE-PI was established. A novel DNA vaccine （pSW3891/MHBs） encoding middle hepatitis B surface antigen can induce significantly humoral and cellular immune responses in rhesus macaques.

关 键 词：核酸疫苗 表面抗原中蛋白 中国猕猴 细胞免疫 体液免疫 

分 类 号：R512.62[医药卫生—内科学]