实时定量RT-PCR监测造血干细胞移植前后CML28 mRNA表达  

作　　者：张东华[1] 戴敏[1] 周红升[1] 汪涯雅[1] 张路[1] 张丽[1] 王斌[2] 曹文静[2] 

机构地区：[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科器官移植研究所造血干细胞研究室,武汉 430030 [2]华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科,武汉 430030

出　　处：《中国生物学文摘》2006年第6期53-53,共1页Chinese Biological Abstracts

摘　　要：本研究的目的在于建立检测CML28 mRNA的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR（RQ-PCR）的方法，并探讨CML28表达水平与异基因造血干细胞移植（Allo—HSCT）后白血病复发之间的相关性，为此构建了pcDNA3.1 HisA-CML28质粒作为定量模板，选择14例白血病患者进行研究．14例患者包括：10例慢性髓系白血病（CML），3例急性髓系白血病（AML），1例Ph阳性急性淋巴细胞白血病（Ph＋ALL）．应用Roche Light Cycler PCR仪动态监测患者移植前后不同时间段的50份骨髓单个核细胞中CML28表达水平．研究结果表明：RQ-PCR的灵敏度为10^-4（0.05ng）水平，标准品日间差及日内差均小于10％，重复性好．初治组中AML和CML加速期（CML-AP）与急变期（CML-BC）患者CML28呈高表达（6.58±2.34）×10^-2，预处理前组CML28水平为（2.19±0.32）×10^-2，移植后1月组CML28水平为（1.35±1.28）×10^-2，移植后3月及以后组（以下简称移植后3月组）CML28水平为（4.57±6.39）×10^-3．定期随访表明，3例CML-AP或BC患者与1例CML慢性期（CML-CP）患者，在Allo-HSCT 3个月后检测仍呈阳性，其中2例CML28 mRNA的水平〈2×10^-2，获无病生存；2例CML28水平〉2×10^-2者，一年内均出现复发，其中1例死亡，另1例行第2次Allo-HSCT后CML28水平虽然迅速下降，但仍〉2×10^-2，2个月后再次复发．结论：CML28水平与疾病的演变过程存在良好的相关性，对于造血干细胞移植受者，动态监测CML28水平比单一的结果价值更大，实时定量检测移植后CML28水平对预测白血病复发有一定的意义．

关 键 词：白血病 AIIo-HSCT CML28 实时定量 RT-PCR SYBR Green I 

分 类 号：Q25[生物学—细胞生物学] S828[农业科学—畜牧学]