柑橘黄龙病和衰退病的同步PCR和RT-PCR检测  

Simultaneous detection of Citrus Huanglongbing and Citrus tristeza virus by multiplex RT-PCR

作　　者：肖远辉[1,2] 丁芳[3] 曾继吾[1] 易干军[1] 张秋明[4] 

机构地区：[1]广东省农业科学院果树研究所 [2]湖南农业大学园艺园林学院,长沙410128 [3]华中农业大学植物科学技术学院 [4]湖南农业大学园艺园林学院

出　　处：《果树学报》2006年第4期642-645,共4页Journal of Fruit Science

基　　金：广东省科技重点计划项目(编号:2003B21601)

摘　　要：柑橘黄龙病(HLB)和衰退病(CTV)是2种危害严重的世界性柑橘病害,国内外对其病原检测的研究相当多。研究建立了同时检测HLB和CTV的多重RT-PCR体系,从影响多重RT-PCR扩增的引物浓度、Mg2+浓度、Taq酶浓度、dNTPs浓度、退火温度等方面进行体系优化。结果表明,多重PCR反应的退火温度应优先考虑退火温度高的引物,退火温度高的引物所需浓度要大于相应退火温度低的引物。该体系实现了DNA病原和RNA病原的统一检测,进一步体现了多重RT-PCR的优越性。Citrus Huanglongbing （HLB） and Citrus tristeza virus （CTV） are two important citrus diseases worldwide. A multiplex reverse transcription-polymerse chain reaction （MuI-RT-PCR） was optimized to simultaneously detect the viruses of HLB and CTV in this article. The reaction of the main ingredients of multiple PCR： Primer,Mg^2＋ ,TaqDNA Polymerase, dNTPs and annealing temperature was examined and optimized. The result showed that the choice of annealing temperature of MuI-RT-PCR should consider the higher annealing-temperature primer and the density of higher annealing temperature primer should be higher. The MuI-RT-PCR provides a simple and rapid method for detecting DNA pathogen （HLB） and RNA pathogen （CTV） in citrus plants.

关 键 词：柑橘黄龙病 柑橘衰退病 RT-PCR 

分 类 号：S436.66[农业科学—农业昆虫与害虫防治]