来自于变性链球菌的脱氧胞嘧啶核苷酸脱氨酶的表达,纯化,结晶以及初步晶体学研究(英文)  

Expression,Purification,Crystallization and Preliminary X-ray Studies of a Deoxycytidylate Deaminase From Streptococcus mutans

作　　者：侯海峰[1,2] 高增强[1,2] 徐建华[1] 许锐[1,2] 李丽琴[1,2] 李兰芬[3] 梁宇和[3] 苏晓东[3] 刘鹏[1] 冼鼎昌[1] 董宇辉[1] 

机构地区：[1]中国科学院高能物理研究所,北京同步辐射实验室 [2]中国科学院研究生院,北京100049 [3]北京大学生命科学学院

出　　处：《生物化学与生物物理进展》2006年第7期673-676,共4页Progress In Biochemistry and Biophysics

基　　金：国家自然科学杰出青年基金资助项目(30325012);国家自然科学基金重点项目"致龋变形链球菌全基因组的蛋白表达及三维结构研究"(30530190);利用同步辐射综合方法研究变性链球菌未知蛋白的结构和功能关系(10575113)~~

摘　　要：脱氧胞嘧啶核苷酸脱氨酶属于脱氧胞苷酸脱氨家族.对来自于变性链球菌UA159的脱氧胞嘧啶核苷酸脱氨酶进行了克隆,在大肠杆菌中进行了表达,最后纯化.快速液相分子排阻色谱分析表明这种酶在溶液中形成六聚体.利用悬滴气相扩散技术获得了这个蛋白的晶体.在北京同步辐射的3W1A线站,收集了衍射分辨率到达3.1!的数据.这个晶体属于P213空间群,其晶胞参数为a=b=c=113.2",!="=#=90°.计算可得马修斯系数为3.6#3·Da-1,据此可估计在一个不对称单位中含有两个单亚基.据目前所知,这是第一个关于野生型的脱氧胞嘧啶核苷酸脱氨酶的结晶学报道.Deoxycytidylate （dCMP） deaminase is an enzyme belonged to dCMP cyt deam family. The dCMP deaminase from Streptococcus mutans UA159 was cloned and expressed in E. coli, and purified to homogeneity. The FPLC size exclusion chromatography analysis reveals that the S. mutans dCMP deaminase forms hexamer in solution. The protein was crystallized using hanging drop vapour-diffusion method and diffracted to a resolution of 3.1 A. The diffraction data were collected at BSRF beamline 3WIA. The crystals belong to P2,3 space group, with unit cell parameters a = b = c = 113.2 A, α =β = γ = 90°. Assuming there are two subunits per asymmetric unit, the Matthews coefficient is 3.6 A^3 ·Da^-1. This is the first crystallization report of the wild-type deoxycytidylate deaminase.

关 键 词：脱氧胞嘧啶核苷酸脱氨酶 变性链球菌 变构调控 结晶 

分 类 号：Q51[生物学—生物化学] O72[理学—晶体学]