戊型肝炎病毒核酸逆转录－套式聚合酶链反应法的建立及应用  

EstablishmentandApplicationofReverseTranscription┐NestedPolymeraseChainReactionforDe┐tectionofHepatitisERNAinSerum

作　　者：朱晓洁[1] 庄辉[1] 朱万孚[1] 朱永红[1] 徐国民[1] 

机构地区：[1]北京医科大学微生物学系

出　　处：《中华预防医学杂志》1996年第6期334-336,共3页Chinese Journal of Preventive Medicine

基　　金：国家"八五"科技攻关课题;美国CMB基金

摘　　要：应用戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）开放读框１（ＯＲＦ１）和开放读框２（ＯＲＦ２）区的两对寡核苷酸作为内外引物，建立了逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）检测ＨＥＶＲＮＡ的方法。用本法检测２只人工感染ＨＥＶ猕猴的１１份系列血清，发现该２只猕猴分别于感染后第六天和第九天ＨＥＶＲＮＡ阳转，并持续至感染后第十七天和第二十二天。检测４１份急性散发性戊型肝炎病人血清，ＨＥＶＲＮＡ阳性率为６８．３％（２８／４１），发病后１～１０天、１１～２０天和２１～３４天的血清ＨＥＶＲＮＡ阳性率分别为７２．７％（１６／２２）、７０．０％（７／１０）和５５．５％（５／９）。提示ＨＥＶ血症持续时间较短。Areversetranscription-nestedpolymerasechainreaction(RT-nPCR)fordetectionofhepatitisEvirus(HEV)RNAinserumwasestablishedusingtwopairsofoligonucleotideacidfromopenreadingframe1and2(ORF1andORF2)ofHEVcDNAastheinnerandouterprimers.ElevenserialserafromtworhesusmonkeysexperimentalyinfectedwithHEVweretestedforHEVRNAwithestablishedRT-nPCR.HEVRNAbecamedetectableinthesetwomonkeysonthesixthdayandtheninthday,respectively,andpersisteduptothe17thandthe22nddayafterinfection,respective-ly.Twenty-eightserumspecimensofthe41patientswithacutesporadichepatitisEwereHEVRNApositive(68.3%).ProportionsofpositiveHEVRNAinpatients′seracolectedonetotendays,11to20daysand21to34daysaftertheironsetofthediseasewere72.7%(16/22),70.0%(7/10)and55.5%(5/9),respectively.ItsuggeststhatviremiaofHEVlastsashorterperiod,andproportionofserumpositiveHEVRNAdecreaseswiththecourseofthedisease.

关 键 词：戊型肝炎病毒 聚合酶链反应 RNA 

分 类 号：R512.630.4[医药卫生—内科学] R373.21[医药卫生—临床医学]