逆转录－巢式聚合酶链反应检测庚型肝炎病毒RNA方法的建立及初步应用  

DetectionofhepatitisGvirus(HGV)byreversetranscriptasenestedpolytnerasecbainreactionanditspre-limlnaryapplication

作　　者：李伯安[1] 程云[1] 罗清华[1] 郭仁峰[1] 马洪滨[1] 张建宗[1] 曹阳[1] 付体权[1] 薛静 李靖[1] 

机构地区：[1]北京解放军302医院免疫研究室

出　　处：《中华实验和临床病毒学杂志》1996年第3期251-253,共3页Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology

摘　　要：庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）基因组为单链、正股ＲＮＡ，全长９３９２ｂｐ。根据５’－非编码区基因序列设计合成两对引物。随机选取酶联抗－ＨＧＶ阳性病人血清３份，阴性病人血清６份，应用逆转录－巢式聚合酶链反应进行检测。结果２份抗－ＨＧＶ阳性血清可见较强的特异扩增带，１份抗－ＨＧＶ阳性血清可见较弱的特异扩增带，其余６份抗－ＨＧＶ阴性血清均无特异性扩增带。特异扩增片断大小与设计相符，并经序列分析及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交给予证实。The.HepatitisGvirus(HGV)isalinearpositive-strandedRNAandmoleculeof9393bpencodingapolyproteinprecursorof2873aminoacidsThe5'untranslatedregion(5,UTR)asthetargetforPCR,twoptirsofprimersweredesigned.Threeserafromanti-HGVpositiveliverdiseasepatientsandsixsamplesfromanti-HGVnegativeliverdiseasepatientswereselectedrandomlyfordetectionofHGVRNA.3PCRamplifiedproductsfrom3anti-HGVposi-tiveserawereidentifiedandnoneofthe6anti-HGVnegativeserumrevealedPCRpositiveamplification.Theamplifiedproductswerefragmentsabout190bpinlengthandidenticaltodesignedfragments.DNAsequencingandSouthern-blotcon-firmedthatthenested-PCRprimerswereofHGV-specificitv.ThismethodhaspotentialvalueinrapiddiasnosisforHGVinfection.

关 键 词：庚型肝炎病毒 聚合酶链反应 RNA 病毒 

分 类 号：R512.6[医药卫生—内科学]