丙型肝炎病毒非结构基因NS5在大肠杆菌中的高效表达  

HighlevelexpressioninE.coliofNS5geneofhepatitisCvirusinanon-fuedform

作　　者：李庆生[1] 郭建平[1] 陶其敏[1] 

机构地区：[1]北京医科大学人民医院肝病研究所

出　　处：《中华实验和临床病毒学杂志》1996年第3期254-257,共4页Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology

摘　　要：应用逆转录－聚合醇链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和基因重组技术，将从中国河北省慢性丙型肝炎患者血中扩增的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ５基因片段，克隆到表达载体ｐＫＰＬ－３ａ中，在大肠杆菌中以天然蛋白形式高效表达了ＮＳ５蛋白，表达量约占菌体总蛋白的２０．３％。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ试验和酶免疫试验（ＥＩＡ）表明，此蛋白可与丙型肝炎患者血清发生特异性反应，AfragmentofhepatitisCvirusNS5gene,amplifiedbyreversetranscriptasepolymerasechainreaction(RT-PCR)fromthebloodsampleofachronichepatitisCpatientinHebeiprovince,China.wasclonedintoanexpcessionvectorpKPL-3a.NS5proteinwasexpressedheavilyinE.coliinanon-fusedformanditaccountedfor20.3%* oftotalbacterialpro-tein.WesternblotandenzynneimmunoassayanalysisshowedthatthisexpressedproteincouldbespecificallyrecognizedbytheserafrompatientswithhepatitisC.Thenon-fusedNS5pmteinexpressedinthislaboratorymayprovidesastartingpointforthestudyonthemechanismofHCVreplication,forthepreparationofmonoclonalandpolyclonalantilodiestoNS5protein,andforsettingupthethirdgenecationAinti-HCVdiagnostic.kitinourcountry.

关 键 词：丙型肝炎病毒 聚合酶链反应 基因 病毒抗原 病毒 

分 类 号：R373.21[医药卫生—病原生物学]