蛋白激酶Cα在小鼠胚胎干细胞定向分化中对发育基因表达的调控作用  

作　　者：高前应[1] 葛坚[1] 王智崇[1] 陈慧怡[1] 黄丹平[1] 袁钊辉[1] 

机构地区：[1]中山大学中山眼科中心,广州510060

出　　处：《中国生物学文摘》2006年第7期15-15,共1页Chinese Biological Abstracts

摘　　要：目的探讨蛋白激酶Cα（PKCα）对小鼠胚胎干细胞（ESCs）定向诱导分化中发育基因（pax-6、slit-2、netrin-1）表达的影响。方法ES—BALB／c细胞株用无白血病抑制因子（mLW）的ESCs培养液培养4d，形成胚胎体（EBs），再分别种植于预置有盖玻片的6孔板和直径100mm的培养皿，经5×10^-7mol／L视黄酸（RA）诱导后，用神经细胞特异性抗原。NSE和NF-200来鉴定分化细胞的类型，在诱导后1、3、5、7及14d用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定细胞的PKCα和发育基因的mRNA表达情况，并观察了：PKC激活剂佛波酯（PMA）和PKC抑制剂D-鞘氨醇对它们表达的影响。结果免疫组化发现在诱导后第3d大多数细胞NSE和NF-200染色阳性，RT-PCR证实诱导后1dPKCα、pax-6和netrin-1的mRNA表达急剧下降，3～7d逐渐升高，至14d恢复至正常水平，而slit-2在诱导前后均无明显表达。PMA可使PKCα、pax-6、netrin-1的mRNA水平在诱导后细胞中的表达明显增强，而D-鞘氨醇的作用相反，使它们的表达显著降低，而对slit-2无明显影响。结论发育基因pax-6和netrin-1在ESCs定向分化为神经样细胞中有重要的调控作用，可能是通过PKCα信号通路起作用。

关 键 词：蛋白激酶CΑ 小鼠 胚胎干细胞 基因表达 调控 细胞分化 视神经疾病 

分 类 号：Q954.4[生物学—动物学] Q26