血小板膜糖蛋白酶联免疫测定法的建立及应用  

Establishmentandapplicationofenzymeimmunoassaysforplateletmembraneglycoproteins

作　　者：奚晓东 赵益明[1,2,3] 吴强 蒋惠源[1,2,3] 李佩霞 阮长耿 

机构地区：[1]江苏省血液研究所 [2]苏州医学院血栓与止血研究室 [3]常州市红十字中心血站

出　　处：《中华医学检验杂志》1996年第4期233-237,共5页

基　　金：江苏省青年医师基金

摘　　要：目的用酶联免疫法对血小板膜糖蛋白（ＧＰ）进行定量和定性测定。方法应用ＳＺ系列抗人血小板单克隆抗体建立了以竞争性酶联免疫法定量测定ＧＰⅠｂ、ＧＰⅡｂ、ＧＰⅢａ及α－颗粒膜蛋白１４０（ＧＭＰ－１４０）在不同血小板表面的表达量；又建立了固相间接酶联免疫法定性测定血小板特异性同种抗原。结果每个正常血小板表面含有ＧＰⅠｂ２１８８４±２４９１分子，ＧＰⅡｂ３９１４１±３６１８分子，ＧＰⅢａ４５２７７±５０７６分子。凝血酶活化血小板表达９００２±１０９５个ＧＭＰ－１４０分子／血小板。血小板无力症纯合子或杂合子可被明确鉴别。对１０种血小板特异性同种抗原的表达进行的人群调查结果表明，人类血小板抗原（ＨＰＡ）－１和ＨＰＡ－４同种抗原的表达频率不同于国外报道的人群频率。结论两种酶联免疫测定法有助于血小板ＧＰ以及血小板免疫学的研究，具有较大的临床推广应用价值。ObjectiveEstablishingenzyme-linkedimmunoassaysforqualitativeandquantitativeanalysisofplateletglycoproteins(GPs).MethodsApplyingtheSZ-seriesmonoclonalanti-humanplateletantibodies,acompetitiveenzymeimmunoassayhasbeendevelopedtoquantitativelyanalysetheexpressionofGPⅠb,GPⅡb,GPⅢaandαgranulemembraneprotein-140(GMP-140)onthesurfaceoftheplateletsfromdiferentsources.Inthisstudy,asolid-phaseindirectenzymeim-munoassayhasalsobeendevelopedtoqualitativelydetecttheplateletaloantigens.ResultsEachnormalplateletexpresses21884±2491moleculesofGPⅠb,39141±3618ofGPⅡband45277±5076ofGPⅢa,while9002±1095moleculesofGMP-140areexpressedonathrombin-activatedplatelet,whichareconsistentwiththewel-acknowledgednormalrangeoftheseglycoproteinsmea-suredbyradioimmunoassay.Glycoprotein-deficientplateletssuchashomozygotesorheterozygotesofGlanzmann′sthrombastheniacouldbediscriminatedbythecompetitiveenzymeimmunoassay.Inthepopulationstudied,thefrequenciesofHPA-1andHPA-4werediferentfromthoseofotherpopula┐tions.ConclusionsDatasuggestedthatthesetwoenzymeimmunoassaysshouldbehelpfultothestudiesofplateletglycoproteinsaswelasplateletimmunologyandmorepotentthanotherserologi-calassaysinclinicalapplication.

关 键 词：血小板 糖蛋白类 血小板膜糖蛋白 ELISA 

分 类 号：R446.11[医药卫生—诊断学]