透明颤菌血红蛋白基因在产TRAIL蛋白大肠杆菌中的克隆表达  

Cloning and Expression of Vitreoscilla Hemoglobin in Escherichia coli for TRAIL Production

作　　者：杨凌超[1] 孙爱友[1] 沈亚领[1] 魏东芝[1] 龚毅[2] 马昱澍[1] 

机构地区：[1]华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所,上海200237 [2]中国科学院上海生命科学研究院生物工程中心,上海200233

出　　处：《华东理工大学学报（自然科学版）》2006年第8期925-929,共5页Journal of East China University of Science and Technology

基　　金：国家863重大科技专项基金资助(2002AA2Z345A)

摘　　要：为解决大肠杆菌高密度发酵生产TRA IL过程中的供氧矛盾,提高菌体的发酵密度,在大肠杆菌中引入透明颤菌血红蛋白基因(vgb)。聚合酶链反应(PCR)检验和CO差光谱法检验表明:vgb基因能够在C 600(pBV 220-TRA IL)中表达并受溶氧调控,重组菌CTV具有良好的遗传稳定性。3.7 L发酵罐实验表明:在同样的发酵条件下,含vgb基因的重组菌CTV的最高菌体密度为对照菌的1.64倍,达到50.6 g/L,乙酸积累为对照菌的55.6%,TRA IL蛋白产量提高了70%,达到2.8 g/L。Vitreoscilla hemoglobin gene （vgb） was cloned and expressed in Escherichia coli C600 （pBV220-TRAIL） for improving the oxygen uptake rate （OUR） and cell density. PCR reactions and carbon monoxide different spectra analysis showed that vgb was successfully expressed in C600 （pBV220-TRAIL）, and this expression system was regulated by dissolved oxygen （DO）. Recombinant engineering strain CTV maintained genetic stability well. Under the same culture conditions, the highest cell density of CTV （50.6 g/L） and the yield of TRAIL （2.8 g/L）was 1.64-fold and 1.7-fold higher than that of control in 3.7 L bioreactor, respectively, whereas the acetic acid concentration was decreased by 45%.

关 键 词：透明颤菌血红蛋白基因(vgb) TRAIL 大肠杆菌 发酵 乙酸 

分 类 号：Q939.9[生物学—微生物学]