链亲和素-磁性微粒的制备及其应用  

作　　者：张志锋[1] 朱宏莉[1] 唐一通[1] 崔婷 耿婷婷 陈超[1] 崔亚丽[1] 

机构地区：[1]西北大学生物芯片研发中心暨国家微检测系统工程技术研究中心,西安710069 [2]陕西西大北美基因股份有限公司,西安710069

出　　处：《中国科学（B辑）》2006年第4期353-360,共8页Science in China(Series B)

基　　金：国家自然科学基金(批准号:20273050);国家高科技发展计划(批准号:2005AA205220)资助项目

摘　　要：通过物理吸附和共价作用机制,制备两种链亲和素-磁性微粒,即链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒,并对其在不同缓冲液中的稳定性进行研究;采用酶抑制法测定两种链亲和素-磁性微粒对游离生物素的结合能力;分别以紫外吸收和固相核酸杂交方法,测定两种链亲和素-磁性微粒对生物素标记寡核苷酸探针的固定化容量及活性,并与Dynabeads（R）M-270 Streptavidin进行比较.结果表明：通过物理吸附作用制备的链亲和素-金磁微粒,适用于核酸杂交与检测常用的STE（Tris-NaCl-EDTA）缓冲系统,通过共价作用形成的链亲和素-氨基磁粒,适用于STE和磷酸盐（PBS）缓冲系统;1 mg链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒对游离生物素的最大结合容量分别为4950和5115 pmol;对生物素标记寡核苷酸探针（24 mer）的结合容量分别为2839和2978 pmol,测定结果均是Dynabeads（R）M-270 Streptavidin的6～7倍;与FITC-标记互补寡核苷酸的杂交结果表明,固定于链亲和素-磁性微粒表面的寡核苷酸探针保持了较好的生物学活性.

关 键 词：链亲和素 磁性微粒 制备 应用 

分 类 号：TQ460.1[化学工程—制药化工]