兔抗重组穿孔素抗体的制备及特性鉴定  

作　　者：董红梅[1] 徐小虎[1] 于晓军[1] 宋卉[2] 王典[1] 

机构地区：[1]汕头大学医学院法医教研室,广东汕头515041 [2]汕头大学医学院药理学教研室,广东汕头515041

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2006年第5期636-637,共2页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30070291);广东省自然科学基金资助项目(04020248)

摘　　要：目的:制备兔抗重组穿孔素的抗体,检测其免疫反应性,并用于穿孔素的体外功能定位分析。方法:以纯化的全长穿孔素融合蛋白DsbAfulllength免疫新西兰大白兔制备抗血清,用免疫双扩法检测抗血清的效价,Westernblot检测抗血清与5个穿孔素侯选活性区域重组融合蛋白的免疫反应性。将活性重组穿孔素体外作用HIV1SF33感染的MT4细胞后,用免疫组化染色法显示穿孔素作用的部位。结果:用免疫双扩法检测表明,兔抗穿孔素融合蛋白抗血清的效价为1∶32;Westernblot显示,抗血清可与穿孔素各重组融合蛋白发生特异性结合;免疫组化显示,穿孔素作用的部位位于靶细胞的胞质和胞膜。结论:制备的兔抗重组穿孔素融合蛋白的抗体具有较好的免疫反应性和特异性,为穿孔素的深入研究提供了有力的工具。

关 键 词：兔抗体 重组穿孔素 特性鉴定 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]