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机构地区:[1]沈阳农业大学畜牧兽医学院,辽宁沈阳110161 [2]中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃兰州730046
出 处:《动物医学进展》2006年第10期62-65,共4页Progress In Veterinary Medicine
基 金:甘肃省科技攻关重点项目(2GS042-A41-001-09);甘肃省自然科学基金暨中青年科技基金项目(3ZS051-A25-065);国家博士后科学基金(20040350585);中国农科院兰州兽医研究所所长基金(200404)
摘 要:以含有人叠朊编码基因Prnd的ORF的质粒HoPrnd-T为模板,PCR扩增出成熟叠朊编码基因片段homDpl,并将其插入原核表达载体pGEX-6P-1的EcoRⅠ和XhoⅠ位点之间,构建出重组表达质粒pGEX-homDpl。将pGEX-homDpl电转化到宿主菌株BL21(DE3)中,以1.0 mmol/LIPTG诱导表达,SDS-PAGE结果显示人成熟叠朊被大肠埃希菌高效表达。HomDpl, the encoding gene of human mature prion-like protein Dopple, was amplified by PCR with the plasmid HoPrnd-T including the ORF of the human Prnd gene as a template. Then HomDpl was inserted into the EcoR Ⅰ - Xho Ⅰ site of pGEX-6P-1 vector to generate recombinant expression plasmid pGEX-homDpl. The pGEX-homDpl plasmid was transformed into host strain E. coli BL21 (DE3) through electroporation. 1.0 mmol/L IPTG was used to induce the recombinant E. coli to express homDpl protein. SDS-PAGE analysis demonstrated that homDpl protein was overexpressed in E. coli .
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