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作 者:陈乃清[1] 赵浩斌[1] 苟德明[1] 樊俊华 魏庆信 渊锡藩[1]
机构地区:[1]西北农业大学动物科学系
出 处:《中国兽医学报》1996年第6期613-620,共8页Chinese Journal of Veterinary Science
基 金:国家自然科学基金;湖北省自然科学基金
摘 要:以McGrath-Solter(1983)提供的去(注)核方法,将猪胚胎的单个卵裂球细胞注入去核的次级成熟卵母细胞,借助电融合的方法(AC:5V,1.5MHz,10~15s;DC:2kV/cm,40μs。电激活/融合液:0.3mol/L甘露醇+0.1mmol/LMgSO4+0.1mmol/LCaCl2+7.5mg/mLCCB)融入受体胞质构成重组胚,体外培养(培养液为改良TCM-199;培养条件为5%CO2,95%空气,38.5℃,饱和湿度)使之发育。实验结果表明:(1)分离单个卵裂球时,以0.25%链霉蛋白酶E消化透明带效果最佳。单个卵裂球获得率可达91.7%(88/96);(2)核受体以激活后2h的卵母细胞优于未激活的卵母细胞,卵裂率分别为64.6%(31/48)和34.5%(19/55)(P<0.05);(3)体外成熟卵母细胞与体内成熟卵母细胞在作为核受体时,其重组胚的发育能力无显著差异(分别为58.7%,65.6%,P>0.05);(4)作为核供体的胚胎对于重组胚的发育能力有显著影响。MZT(maternalzygotetransfer,母子转变,是指早期胚胎发育由母源控制向合子控制的转折点)以后的?
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