绵羊胎儿成纤维细胞不同处理对核移植重构胚发育的影响  

作　　者：王海[1] 敖红[2] 潘求真[3] 李荣旗[4] 赵孟彬[4] 连正兴[5] 李宁[5] 吴常信[5] 

机构地区：[1]中国科学院动物研究所,北京100080 [2]中国农业科学院畜牧研究所,北京100094 [3]东北农业大学,哈尔滨150030 [4]北京锦绣大地农业股份有限公司,北京100049 [5]中国农业大学动物科技学院

出　　处：《中国科学（C辑）》2006年第5期398-404,共7页Science in China(Series C)

基　　金：国家"973"计划项目(批准号:2001AA213031);农业结构调整重大专项(编号:05-07-04B)

摘　　要：研究供体细胞代数、大小、周期以及基因转染处理对重构胚发育的影响．结果如下：（i）体外培养5—7代细胞做供体核，重构胚的桑椹／囊胚率显著高于16—18代细胞的桑椹／囊胚率（17．3％vs4．9％，P〈0．05）；（ii）15—25μm细胞做供体核，重构胚的桑椹／囊胚率为20．0％，高于8—15μm细胞、25—33μm细胞桑椹／囊胚率（8．0％，9．7％），但效果不显著（P〉0．05）；（iii）血清饥饿与非血清饥饿的细胞做供体核，重构胚的桑椹／囊胚发育率没有显著性差异（11．8％vs．18．6％，P〉0．05），但非血清饥饿的效果要好于血清饥饿；（iv）用0．05μmol／L秋水仙素处理供体细胞效果最好，重构胚的桑椹／囊胚率可达27．5％，而未处理或用0．1μmol／L秋水仙素处理供体细胞，重构胚的桑椹／囊胚率分别为17．1％和12．1％，但三者之间差异不显著（P〉0．05）；（v）以转染绿色荧光蛋白基因（GFP）细胞做供体核，重构胚的桑椹／囊胚率显著低于非转基因细胞做供体核的桑椹／囊胚率（3．1％vs．20．4％，P〈0．05）．上述结果表明，传代少、中等大小的细胞更适合做供体核；血清饥饿没有必要；用0．05μmol／L秋水仙素处理供体细胞有利于重构胚的发育；转基因供体细胞对重构胚发育有影响．

关 键 词：绵羊 胎儿成纤维细胞核移植 秋水仙素 血清饥饿 绿色荧光蛋白基因(G即) 

分 类 号：Q813[生物学—生物工程]