人双突变型低氧诱导因子1α真核表达载体的构建及鉴定  

作　　者：童锴[1] 谢宜军[1] 王月刚[1] 吴平生[1] 

机构地区：[1]南方医科大学南方医院心内科,广州510515

出　　处：《广东医学》2006年第11期1650-1652,共3页Guangdong Medical Journal

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:30370587)

摘　　要：目的构建能在哺乳动物细胞得到常氧下高表达的携带HIF-1α突变型HIF-1α-Ala402-Ala564基因真核表达载体pShuttle2-HIF1α-Ala402-Ala564。方法采用分子克隆技术,在业已完成的pShuttle2-HIF1α-Ala564的基础上,用连续聚合酶链式反应(PCR)定点突变的方法将其第402位脯氨酸密码子CCA突变为丙氨酸密码子GCA,构建成双突变HIF-1α真核表达载体pShuttle2-HIF-1α-Ala402-Ala564。结果经酶切鉴定及基因测序证实人双突变型低氧诱导因子1α真核表达载体pShuttle2-HIF1α-Ala402-Ala564构建成功。结论成功构建重组人双突变型低氧诱导因子1α真核表达载体pShuttle2-HIF1α-Ala402-Ala564,为缺血性心脏病的HIF-1α基因治疗研究奠定基础。

关 键 词：低氧诱导因子-1Α 突变型 真核表达载体 基因治疗 

分 类 号：R382.31[医药卫生—医学寄生虫学]