萝卜MSAP体系优化与抽薹过程中MSAP分析  

作　　者：柳李旺[1] 宋贤勇[1] 龚义勤[1] 杨金兰[1] 汪隆植[1] 

机构地区：[1]南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏南京210095

出　　处：《江苏农业科学》2006年第6期203-206,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金项目(编号:30300238;30571193);江苏省自然科学基金项目(编号:KB2004418);江苏省高技术研究计划项目(编号:BG2005314)

摘　　要：对萝卜基因组DNA的MSAP关键步骤进行了优化并应用于抽薹过程中甲基化样式分析。研究表明,MSAP分析需要较高纯度的模板DNA,HpaⅡ/M spⅠ-EcoRⅠ酶切连接体系中可选用10×T+0.1%BSA Buffer作为通用缓冲液,适宜的酶切连接条件为37℃,4 h;预扩增产物稀释50倍作为选择性扩增体系反应模板,用优化的体系可获得稳定的MSAP银染指纹图谱;在优化体系的基础上,使用18对引物分析了萝卜抽薹过程中DNA甲基化水平的变化情况,结果表明在未现蕾—现蕾—抽薹过程中基因组DNA甲基化水平先降低,随着花茎的伸长DNA甲基化水平又逐渐上升,各个时期,CCGG内侧胞嘧啶完全甲基化程度均高于半甲基化的程度。

关 键 词：萝卜 抽薹 MSAP DNA甲基化 体系优化 

分 类 号：S631.103.2[农业科学—蔬菜学]