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检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
作 者:杜道林[1] 王锐萍[1] 杨国锋[1] 符碧[1] 吴文芳[2]
机构地区:[1]海南师范大学生物系,海南海口571158 [2]中国科学院沈阳生态研究所,辽宁沈阳110016
出 处:《蛇志》2006年第4期257-260,共4页Journal of Snake
基 金:This work was supported by The Science Foundation of Hainan Province(No.30239).
摘 要:从长白蝮蛇克隆的类凝血酶Ussurin Cdna被克隆进入pET-32α(+)中与5′端与Thx.Tag和6xHis相连的T7启动子下,构建成大肠杆菌表达载体pET-32α(+)-Ussurin;再转化感受态E.coli BL(21)DE3细胞,构成表达工程菌株;于IPTG诱导下表达,在细胞质中产生约占细胞质总蛋白10%的具有生物活性的Ussurin。The gene of Ussurin, a thrombin-like enzyme from Agkistrodon halys ussuriensis, was expressed in Escherichia coli using expression system of pET-32α(+). The gene was expressed under T7 promotor with a fusion partner of Thx. Tag and a 6xHis. Tag at its 5'terminal. After induction by IPTG for 4 h, the recombinant enzyme was expressed in the cytoplasm. Expression amount of recombinant ussurin in Cytoplasm is about 10% of the total protein in cytoplasm.
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