鸡毒霉形体H3株TM-1基因与鸡白细胞介素2基因串联子在大肠杆菌中的共表达  

Co-expression of ChIL-2 gene with TM-1 gene of Mycoplasma gallisepticum H3 strain in Escherichia coli

作　　者：郭志刚[1] 郝永清[1] 张爱荣[1] 

机构地区：[1]内蒙古农业大学动物科学与医学学院,内蒙古呼和浩特010018

出　　处：《中国兽医科学》2006年第12期967-971,共5页Chinese Veterinary Science

基　　金：内蒙古农业大学博士科研启动基金项目(BJ04-4)

摘　　要：运用DNA重组技术将鸡白细胞介素2基因和鸡毒霉形体H3株TM-1基因进行串联,插入到pET-30a(+)质粒的EcoRⅠ和HindⅢ多克隆位点间,经PCR鉴定、双酶切鉴定和序列测定,表明已成功构建了含鸡毒霉形体H3株TM-1基因和鸡白细胞介素2基因的融合基因,将含有此融合基因的重组质粒命名为pET-30a(+)-TM-1-IL-2。将此重组质粒转化E.coliBL21(DE3)菌株。经IPTG 37℃诱导表达4 h后,SDS-PAGE电泳结果显示,此融合基因得到了表达,所表达出的融合蛋白的分子质量约为43 ku,主要以包涵体形式存在。表达产物在尿素存在下经超声波处理,获得了纯化的融合蛋白。这为进一步研究鸡白细胞介素2及鸡毒霉形体的生物学活性奠定了基础。TM-1 gene from Mycoplasma gallisepticum （MG） H3 strain was linked with chicken IL-2 （ChIL-2） gene by DNA recombination technology and inserted into EcoR Ⅰ /Hind Ⅲ multiple clone site （MCS） of pET-30a（＋） plasmid as a fusion gene. PCR amplification, restriction digestion and sequencing confirmed that the recombinant plasmid containing the fusion gene was constructed, and designated pET- 30a（ ＋）-TM-1-IL-2. Then, pET-30a（ ＋ ）-TM-1-IL-2 was transformed into Escherichia coli BL21 （DE3）. SDS-PAGE analysis showed that the fusion gene was expressed efficiently in E. coli BL21（DE3） under induction of IPTG at 37 ℃ for 4 h and the expressed fusion protein was 43 ku in size as inclusion bodies. The fusion protein was purified by supersonic treatment with urea. The result provided a basis for further studies of the bioactivity of ChIL-2 and MG.

关 键 词：鸡毒霉形体 白细胞介素2 融合基因 原核表达 

分 类 号：S852.62[农业科学—基础兽医学] Q786[农业科学—兽医学]