苦瓜ISSR-CR反应体系的建立  

Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Momordica charantia L.

作　　者：王绪[1] 邓俭英[2] 方锋学[2] 张曼[2] 张玲玲[1] 孙德利[1] 

机构地区：[1]广西大学,南宁530004 [2]广西农科院蔬菜研究中心,南宁530007

出　　处：《种子》2007年第1期15-18,共4页Seed

基　　金：广西"新世纪十百千人才工程"专项资金项目(资金批准号:2003211);广西青年科学基金项目(桂科青0447015);广西农科院科技发展基金项目(2003006(Z))

摘　　要：以苦瓜（Momordica charantia L．）为试材，研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度、循环次数对苦瓜ISSR扩增结果的影响。结果表明：在20μl的反应体系中，Mg^2＋的用量为1．2—1．6mmol／L，dNTPs浓度为0．2mmol／L，引物的浓度为0．25μmol／L，Taq DNA聚合酶的用量为1u，模板DNA的用量为30～50ng，在46．4—51.7℃的退火温度下35个循环，能得到清晰、多态性高的ISSR带谱。The factors that affected the ISSR（ inter-simple sequence repeat） result ofMomordica charantia L. were studied. By adjusting Mg^2 ＋ , dNTPs, primer, Taq DNA polymerase and DNA template concentration, annealing temperature and circles were optimized. The results showed that the optimized content consists of Mg^2＋ 1.2 - 1.6 mmol/L, dNTPs 0.2 mmol/L, primer 0.25 μmol/L, Taq DNA polymerase 1 U, DNA template 30 - 50 ng, annealing temperature was 46.4 - 51.7 ℃, circles was 35 in zoul reaction system.

关 键 词：苦瓜 ISSR(inter—simple SEQUENCE repeat) 反应体系 优化 

分 类 号：S642.5[农业科学—蔬菜学] S330.29[农业科学—园艺学]