萝卜mRNA差异显示技术反应体系的优化及应用  

作　　者：张慧蓉[1] 龚义勤[1] 柳李旺[1] 杨金兰[1] 黄丹琼[1] 李培[1] 宋闲勇[1] 

机构地区：[1]南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏南京210095

出　　处：《江苏农业科学》2007年第1期76-80,共5页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金(编号:30300238);江苏省自然科学基金(编号:BK2004418);江苏省高技术研究计划(编号:BG2005314);南京农业大学SRT项目

摘　　要：以萝卜品种短叶十三为材料，对影响mRNA差异显示（DDRT—PCR）反应体系的主要因子进行优化试验，最终确定了优化体系（15μl）：随机引物0．5μmol／L，锚定引物1．0μmol／L，dNTPs0．1—0．2mmol／L，Mg^2＋1．5mmol／L，模板cDNA 15ng，TaqDNA聚合酶0．9U；并对PCR扩增程序中的复性温度进行梯度筛选，表明40℃较适合于萝卜mRNA差异显示（DDRT-PCR）反应体系。同时应用该优化体系分别对短叶十三花芽分化和扬花萝卜、春萝卜BYC抽薹过程中基因的差异表达进行初步分析。

关 键 词：萝卜 差异显示技术 体系优化 应用 

分 类 号：S631.103.6[农业科学—蔬菜学]