玫瑰黄链霉菌几丁质酶基因的克隆及拼接表达  被引量:4

Cloning of Chitinase Gene from Streptomyces roseoflavus and Its Splicing Expression in Escherichia coli

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作  者:刘力强[1,2] 张维宏[1] 李亚宁[1] 杨文香[1] 刘大群[1] 

机构地区:[1]河北农业大学植物保护学院,河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心,保定071001 [2]华北制药集团新药研发有限责任公司

出  处:《农业生物技术学报》2007年第1期129-132,共4页Journal of Agricultural Biotechnology

基  金:国家自然科学基金项目(No.30370955);河北省自然科学基金项目(No.303192)资助。

摘  要:应用PCR扩增克隆到玫瑰黄链霉菌(Streptomyces roseoflavus)的几丁质酶基因chiC的整个催化域部分,将其与包含信号肽区、纤维素结合区、几丁质结合区三个结构功能域的链霉菌(S.lividans)chiC基因片段相连接,插入pET23b(+)质粒上,构建表达载体pLCH,用来转化大肠杆菌(Escherichia coli)JM109(DE3),转化子进行破壁之后在胶体几丁质酶培养基上表现活性。After getting the chiC catalytic domain of Streptomyces roseoflavus by PCR, the catalytic domain was connected with S. lividans chiC fragment which contains three domains (cellulose binding domain, chitin-binding domain and signal peptide domain) and cloned into pET23b(+). Then the recombinant plasmid pLCH was transformed into Eschcrichia coil JM109(DE3).After the transformat expression was induced with IPTG, its chitinasc activity was found on the chitin culture medium.

关 键 词:玫瑰黄链霉菌 几丁质酶 克隆 表达 

分 类 号:S188[农业科学—农业基础科学]

 

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