日本血吸虫琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白全长cDNA的克隆、表达及保护性免疫评价  

作　　者：余俊龙[1] 汪世平[1] 李文凯[1] 戴橄[1] 徐绍锐[1] 何卓[1] 彭先楚[1] 周松华[1] 刘雪琴[1] 

机构地区：[1]中南大学湘雅医学院寄生虫学系,长沙410078

出　　处：《中国科学（C辑）》2007年第1期58-64,共7页Science in China(Series C)

基　　金：国家"十五"重大科技专项(2002AA2Z3343);国家高技术研究发展计划("863"项目)(2004AA2Z3530);湖南省"十一五"重大专项(2006SK1001);湖南省重点学科建设专项(03-985-3-7)

摘　　要：根据GenBank日本血吸虫(Schistosoma japonicum)琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白(SjSDISP)不完整的表达序列标签(BU804141)以及日本血吸虫成虫cDNA文库载体多克隆位点邻近核苷酸序列设计引物,以日本血吸虫成虫cDNA文库为模板,采用锚式PCR策略,对SjSDISP cDNA不完整的3′端和5′端进行扩增、测序,用序列比对拼接电子软件比对,基于重叠区进序列合并,获得1071bp的SjSDISP全长cDNA.序列分析推断该片段含有编码SjSDISP基因的完整阅读框,编码278个氨基酸残基.将其编码基因克隆到原核表达载体pQE30上,在大肠杆菌M15中获得准确、高效表达,表达产物分子量约为32kD.用日本血吸虫成虫抗原免疫血清对表达产物进行Western blot检测,在预测位置上出现明显的识别条带.用纯化的重组蛋白rSjSDISP免疫小鼠,进行动物免疫保护性评价,在虫荷、每克肝卵、每克粪卵和每雌子宫内卵数方面,与佐剂对照组比较差异均具有显著性(P<0.05,P<0.01).结果表明,日本血吸虫琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白酶(SjSDISP)全长cDNA成功克隆并在大肠菌中得到表达;表达产物具有良好的抗原性和动物免疫保护效果,是一种潜在的具有部分免疫保护性的抗日本血吸虫病疫苗候选分子.

关 键 词：日本血吸虫 琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白 基因克隆 基因表达 免疫保护 

分 类 号：R383[医药卫生—医学寄生虫学] Q78[医药卫生—基础医学]