GM－CSF工程菌构建及鉴定  

Construction of GM-CSF Expression vector and Detection

作　　者：韩金祥 宋长征 梁浩 张翠 王美岭 王革[1,2] 

机构地区：[1]山东省医科院生物技术中心 [2]中国科学院生物物理研究所

出　　处：《药物生物技术》1996年第4期193-196,共4页Pharmaceutical Biotechnology

摘　　要：采用ＰＣＲ技术，从细胞中克隆粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）并在５′端设计上凝血酶切位点，５个组氨酸密码子、起始密码子及ＥＣＯＲⅠ酶切位点，在３′端设计上ＢａｍＨＩ酶切位点，将扩增产物酶切后克隆到ＰＢＶ２２０质粒的ＥＣＯＲⅠ－ＨｉｎｄⅢ酶切位点，转化大肠杆菌ＤＨ５α，筛选阳性重组子（ＰＧＭ０９／ＤＨ５α），经细菌形态，菌落形态及细菌生化鉴别均符合要求，在Ｅ．Ｃｏｌｉ中获高效表达，表达量占体总蛋白的３１．２％，生物活性为１．１×１０７Ｕ／Ｌ发酵液。

关 键 词：GM-CSF 基因表达 鉴定 工程菌 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]