含HIV-1 gag基因的重组腺病毒5型与35型嵌合病毒免疫效果研究  

lmmtmogenicity of a chimeric adenovirus type 5 vector with type 35 fiber containing HIV-1 gag in mice

作　　者：刘新蕾[1] 余双庆[2] 冯霞[2] 王小利[1] 刘红梅[2] 张晓梅[2] 李红霞[2] 周玲[2] 李泽琳[1] 曾毅[1,2] 

机构地区：[1]北京工业大学生命科学与生物医学工程学院病毒与药理室, 100022 [2]中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肿瘤室

出　　处：《中华实验和临床病毒学杂志》2007年第1期5-7,共3页Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology

基　　金：国家863计划（2001AA215031）;中国综合性艾滋病研究项目（CIPRA）;国家自然科学基金（30370067）

摘　　要：目的 探讨含HIV-1 gag基因的重组腺病毒5型与35型嵌合病毒（rAd5／F35）在BALB／c小鼠中的免疫效果。方法 PCR，间接免疫荧光鉴定HIV-1 gag基因在重组腺病毒（rAd5／F35-mod．gag）的正确插入和体外细胞水平的表达，用rAd5／F35-mod．gag以不同的方式免疫BALB／c小鼠，ELISA检测小鼠血清中的p24特异性抗体，细胞内细胞因子染色法检测小鼠的特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）应答。结果 重组腺病毒rAd5／F35-mod．gag在体外细胞水平可以很好的表达目的基因gag；在小鼠体内重组腺病毒rAd5／F35-mod．gag可诱导特异性的CTL应答和血清IgG抗体反应，用rAd5／F35单独免疫2次，所诱发的CTL和血清IgG反应最强。但Ad5初次感染后，产生的抗Ad5抗体可以抑制rAd5／F35疫苗的特异性免疫反应。结论 重组腺病毒rAd5／F35-mod．gag单独免疫可在小鼠体内诱导特异性的CTL应答和血清IgG抗体反应。只改变Ad5纤突蛋白Fiber，不能避免抗Ad5抗体的抑制作用。Objective To study the immune effect of a chimeric adenovirus type 5 vector with type 35 fiber （rAd5/F35） vaccine in BALB/c mice. Methods The expression of HIV Gag protein was determined using indirect immunofluorescent staining. The rAd5/F35-mod.gag vector was injected intramuscularly to mice. The IgG antibody was detected by ELISA and CTL response was detected by intracellular cytokine stain assay. Results The rAd5/F35-mod.gag vector could express HIV Gag protein in vitro and generate strong HIV-specific immune responses in vivo. But anti-Ad5 immunity could limit its immunogenicity in vivo. Conclusion The rAd5/F35- mod. gag vector can elicit specific CTL response and IgG antibody in animal model. In mice with high Ad5 vectorspecific immunity, Ad5/F35-mod.gag showed lower level of Gag specific CTL and antibody response than in mice without pre-existing adenovirus type 5 immunity. The results indicated that fiber exchange alone does not evade pre-existing Ad5 immunity.

关 键 词：HIV-1 艾滋病疫苗 腺病毒科 

分 类 号：R686[医药卫生—骨科学]